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缓冲剂和PBS配方 以及作用原理和其他缓冲剂对比详细介绍!

时间:2020-11-05 21:46:40

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导读:缓冲剂是能被用来控制高温高压状态下,或常温常压下,气体或液体逸度的固体组合,它可以是固态的也可以是液态的。

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化学工程中的缓冲剂常称为酸碱稳定剂,而体外诊断试剂同样会用到。一般是盐类,如强酸弱碱或弱酸强碱盐类,在反应或保存中逐渐释出盐中的酸或碱以保持稳定的酸碱值。

PBS缓冲溶液

一,缓冲剂分类

1,氧缓冲剂

氧缓冲剂是包括水在内的固体组合,在固定温度和总压条件下能产生恒定的氧逸度,用于H-O体系。

2,石墨缓冲剂

在一定温度和总压条件下,石墨的存在确定了体系的各种气相成分和逸度,用于C-O体系。

3,氧和石墨联合缓冲剂

用于C-O-H体系。

4,酸碱缓冲剂

酸碱缓冲剂通常为溶液,也称酸碱缓冲溶液,是一种能对溶液缓冲溶液中加入少量酸或少量碱,或因溶液的酸度起稳定作用的溶液。若往溶液中加入少量酸或少量碱,或因溶液中发生的化学反应产生了少量酸或少量碱,或将溶液稍加稀释,溶液的酸度基本不变。

缓冲剂在电镀中能抑制电镀液pH值的变化。如镀镍溶液中加入硼酸,其缓冲范围与电镀液的pH值5~6接近,因而它能有效地抑制电镀过程中引起的阴极附近溶液pH值的变化。此外,在其他一些电镀溶液中,铵盐、醋酸盐、柠檬酸盐等也得到应用。

二,作用原理

当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。

三,缓冲能力

在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。

四,特殊举例:pbs缓冲液

1,PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供双价阳离子。

注:PBS不是磷酸缓冲液(phosphate buffer solution,PB)。

2,配制方法

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:

称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。

PBS:Phosphate Buffered Saline

PBS 1L配方pH7.4:

磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g,

磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.44g,

氯化钠(NaCl):8g,

氯化钾(KCl):0.2g,

加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。

3,保存方法

加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。

PBS缓冲液(pH7.2~7.4):

KH2PO42mM

Na2HPO4 8mM

NaCl 136mM

KCL 2.6mM

PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。

1x PBS缓冲液就是0.01M的磷酸盐缓冲液,可直接使用。2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。

0.1M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。

4,作用

PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释

原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用

蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;

生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。注意:PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。

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