乙肝病毒DNA 定量检测是HBV感染的一种病原学诊断手段。与 HBV 感染的传统血清学标志物检测相比,其优势是高灵敏度。每一个乙肝患者在诊疗过程中,都要反复检测该指标。
但是由于检测手段自身存在的诸多问题,受到实验环境、试剂质量、实验器材等多方面因素的限制。一些地方不具备实验条件、试剂质量有问题、技术人员素质差,都可能造成不少假阳性,形成冤假错案;也可能造成假阴性,而形成漏网之鱼。
造成 HBV DNA 定量检测假阴性的常见原因有:
①HBV DNA 检测试剂质量差,灵敏度较低,使 HBVDNA 载量较低的标本漏检;
②标本采集、运送或保存不当,导致 HBV DNA 被 DNA 酶降解、断裂;
③标本中存在抑制 PCR 过程的物质,如肝素抗凝、血脂过高、溶血等;
④HBV DNA 发生变异,致使 PCR 检测的引物、探针与 HBV DNA 靶片段不能有效互补结合,不能形成扩增产物或无法产生荧光信号。
造成 HBV DNA 检测假阳性的原因:
①标本被污染;
②因人员操作不当或试剂质量等原因导致扩增曲线不平滑、不稳定,在一定热循环数以后扩增曲线出现折线或“翘尾”现象,被系统误检为阳性信号。
后者可导致一种令临床医师和患者特别困惑的现象,即已长时间抗病毒治疗的患者,突然检测到低水平的血清 HBV DNA,一般在最低检测限左右,如 (1-2)×10^3 拷贝/mL,被误以为病毒学反弹或复发,但立即到不同医院或同一医院进行复检,结果 HBVDNA 低于检测下限。对于此种结果,最好的处理办法是进行重复检测。
HBV DNA 检测假阳性与假阴性的发现,有赖于临床医师与医学实验室检验技术人员保持良好的沟通。当临床医师对检测结果有疑问时,应及时向实验室提出,实验室技术人员应采取核对标本是否有误、重新检测、重新抽血、更换检测试剂盒等方法加以复核。
最后需要指出的是,乙肝病毒DNA定量检测结果,不同医院和医学实验室,由于采用方法与试剂的不同,使用单位的不同,报告结果可比性较差。国家亦未出台统一标准,其正常值和异常值范围都难以统一,各地、各单位检测数据没有可比性。
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